Тест по теме «Генная инженерия» с ответами и объяснениями: 22 вопроса

Диагностика: от изменения ДНК к проверке результата

Генная инженерия — это не просто «перенос одного гена». В современной биологии к ней относят лабораторные способы целенаправленно изменять ДНК: добавлять, удалять или заменять участки, собирать рекомбинантные конструкции и проверять, как изменение влияет на клетку или организм. В этом тесте важно не угадывать название метода, а прослеживать цепочку «цель → действие с ДНК → контроль результата».

Содержание статьи13 разделов

Диагностическая ситуация

Ученик утверждает: «Если в клетку попал новый фрагмент ДНК, значит нужный признак обязательно проявится». Это распространённое заблуждение. Для проявления признака важно не только наличие последовательности, но и её корректное включение или поддержание, регуляторные элементы, работа транскрипции и трансляции, а также проверка того, что изменение действительно произошло там, где планировалось.

Мини-опора: 6 фактов перед тестом

1. Генетическая инженерия целенаправленно изменяет ДНК лабораторными методами.

2. Вектор переносит нужную последовательность в клетку и часто обеспечивает её копирование или экспрессию.

3. Рестриктазы узнают определённые последовательности и разрезают ДНК; лигаза соединяет фрагменты.

4. Для экспрессии гена важны регуляторные элементы, например подходящий промотор.

5. Селекция помогает отобрать клетки, получившие конструкцию, а скрининг — отличить нужный вариант от ненужного.

6. Любой вывод о результате требует контроля: одного факта «клетки выросли» обычно недостаточно.

Основной тест

Выберите один ответ в каждом задании. После нажатия «Проверить результат» появятся отметка «верно/неверно», правильный вариант и пояснение к каждому вопросу.

1 Какое описание точнее всего соответствует генной инженерии?

2 Исследователь хочет получить клетку, которая устойчиво несёт дополнительный фрагмент ДНК. Что в такой задаче чаще всего называют вектором?

3 Какова основная роль рестриктазы в классической технологии рекомбинантной ДНК?

4 Какой фермент непосредственно образует фосфодиэфирную связь при соединении совместимых фрагментов ДНК?

5 Почему наличие подходящего промотора важно, если цель — получить белок из введённого гена?

6 После трансформации бактерий выросли колонии на среде с антибиотиком. Какой вывод наиболее обоснован?

7 Какой результат лучше всего подтверждает, что нужный фрагмент ДНК действительно присутствует в конструкции?

8 Чем селекция отличается от скрининга в эксперименте с рекомбинантными клетками?

9 Что означает термин «трансгенный организм» в строгом учебном смысле?

10 Почему при экспрессии некоторых эукариотических генов в бактериях удобно использовать кДНК, полученную по зрелой мРНК?

11 Для чего плазмидному вектору нужен участок начала репликации?

12 Какое изменение может относиться к генной инженерии, даже если чужой ген не добавляли?

13 Почему отрицательный контроль важен при проверке результата PCR после генетической модификации?

14 Что лучше всего показывает различие между «наличием гена» и «экспрессией гена»?

15 Две плазмиды содержат одинаковый ген, но в одной перед ним есть подходящий для хозяина промотор, а в другой нет. Какой прогноз разумнее?

16 В классическом клонировании два фрагмента имеют несовместимые липкие концы. Какое следствие наиболее ожидаемо без дополнительных операций?

17 В системе CRISPR-Cas направляющая РНК прежде всего помогает чему?

18 Почему после редактирования ДНК важно проверить возможные изменения вне запланированного участка?

19 Какой набор данных сильнее всего поддерживает вывод, что модификация вызвала изменение признака?

20 Что называют «нокаутом» гена в экспериментальной генетике?

21 В опыте 100 колоний устойчивы к антибиотику, но только 42 дают PCR-полосу ожидаемого размера. Какой вывод лучше?

22 Почему результат генетической модификации нельзя оценивать только по одному фенотипическому признаку?

Результат появится после проверки.
Как использовать результат: 18–22 правильных: основные связи между конструкцией, переносом и контролем освоены; 13–17: повторите различие селекции и скрининга, роль регуляторных элементов; 0–12: начните с функций вектора, рестриктазы, лигазы и логики проверки результата.

Типичные ошибки после проверки

«Вектор = фермент»

Вектор — это молекула-носитель, например плазмида. Ферменты выполняют химические операции с ДНК: разрезают, соединяют или копируют её.

«Отбор доказал наличие нужной вставки»

Маркер отбора часто показывает лишь то, что клетка получила вектор. Нужную вставку и её ориентацию подтверждают дополнительными методами.

«Любой внесённый ген сразу работает»

Экспрессия зависит от регуляторных последовательностей и клеточного контекста. Наличие ДНК и работа гена — разные утверждения.

«Генная инженерия всегда означает перенос гена другого вида»

Изменение может быть гораздо меньше: замена одного нуклеотида, удаление участка или редактирование регуляторной области.

Открытые мини-задания без автоматического балла

1. Объясните, почему после отбора устойчивых колоний всё равно нужен скрининг вставки.

Критерий хорошего ответа: Хороший ответ различает селекцию и проверку конкретной конструкции и называет хотя бы один способ подтверждения: PCR, анализ размера фрагмента, секвенирование.

2. Составьте цепочку действий для проверки гипотезы «вставленный ген экспрессируется».

Критерий хорошего ответа: Нужно разделить подтверждение ДНК-конструкции и проверку продукта гена; логика должна идти от генотипа к экспрессии, а не наоборот.

3. Почему одинаковая кодирующая последовательность может экспрессироваться по-разному в двух клетках?

Критерий хорошего ответа: Укажите роль регуляторных элементов, доступности факторов транскрипции и клеточного контекста.

Что повторить по ошибкам

  • Ошибки 1–5: определения и инструменты
  • Ошибки 6–14: перенос, селекция, экспрессия
  • Ошибки 15–22: дизайн опыта и доказательность

Возвращайтесь не только к термину, но и к причинной связи: что делает компонент, какой результат ожидается и какой контроль позволяет отличить правильное объяснение от случайного совпадения.

Ключ и объяснения (статический резерв)
  1. B. Целенаправленное изменение ДНК лабораторными методами
    Генная инженерия предполагает намеренное изменение генетического материала с помощью лабораторных технологий. Скрещивание и культивирование могут использоваться рядом с ней, но сами по себе не являются определением генной инженерии.
  2. D. Молекулу-носитель, переносящую вставку в клетку
    Вектор — это ДНК-молекула-носитель, часто плазмида или вирусный вектор, которая доставляет нужную последовательность. Ферменты могут помогать собирать конструкцию, но не выполняют роль носителя.
  3. A. Разрезать ДНК в определённых последовательностях
    Рестрикционные эндонуклеазы узнают определённые последовательности ДНК и разрезают её в этих местах. Соединение фрагментов выполняет ДНК-лигаза, а разделение по размеру — электрофорез.
  4. C. ДНК-лигаза
    ДНК-лигаза соединяет соседние концы ДНК, восстанавливая непрерывность сахарофосфатного остова. Рестриктаза, напротив, создаёт разрывы, поэтому эти ферменты выполняют разные этапы работы.
  5. A. Промотор служит местом начала транскрипции и помогает клетке «прочитать» ген
    Промотор — регуляторная область, с которой начинается транскрипция при участии РНК-полимеразы и других факторов. Поэтому наличие гена без подходящей регуляции ещё не гарантирует его экспрессию.
  6. B. Клетки в колониях, вероятно, получили маркер устойчивости, связанный с вектором
    Рост на селективной среде подтверждает наличие признака, по которому проводился отбор, например маркера устойчивости. Он не доказывает автоматически правильность вставки, её ориентацию или экспрессию.
  7. D. Получение PCR-продукта ожидаемого размера с подходящими контролями
    PCR с праймерами к нужному участку может показать наличие ожидаемой последовательности, особенно если результат сопоставлен с положительным и отрицательным контролями. Один лишь рост клеток или факт наличия плазмиды не говорит, какая именно вставка в ней находится.
  8. C. Селекция отбирает клетки по заданному признаку, скрининг выявляет среди них нужную конструкцию
    Селекция уменьшает число кандидатов: например, оставляет клетки с вектором благодаря маркеру устойчивости. Скрининг затем различает варианты внутри отобранной группы и помогает найти именно нужную вставку.
  9. A. Организм, в геном которого искусственно внесена чужеродная последовательность ДНК
    Трансгенным называют организм или клетку, геном которых искусственно изменён внесением одной или нескольких чужеродных последовательностей. Не всякая генетически модифицированная система обязательно трансгенна: изменение может быть сделано и без добавления ДНК другого вида.
  10. D. Потому что кДНК соответствует уже сплайсированной мРНК и не содержит интронов этой транскрипционной единицы
    Бактерии не выполняют сплайсинг эукариотической пре-мРНК так, как это делают эукариотические клетки. КДНК, синтезированная по зрелой мРНК, содержит последовательность экзонов без интронов и поэтому удобна для многих систем экспрессии.
  11. A. Чтобы вектор мог копироваться в подходящей клетке-хозяине
    Участок начала репликации позволяет клеточной системе копировать плазмиду. Без совместимого origin of replication плазмида обычно не сможет устойчиво поддерживаться как автономная молекула в выбранном хозяине.
  12. B. Замена одного нуклеотида в заданном участке ДНК
    Современная генная инженерия включает точечные изменения: замену оснований, небольшие делеции и другие целенаправленные редактирования. Перенос гена между видами — лишь один из возможных вариантов.
  13. C. Он помогает заметить сигнал, возникший из-за загрязнения или неспецифической реакции
    В отрицательном контроле целевого шаблона быть не должно. Если там появляется продукт, это предупреждает о контаминации или иной проблеме, поэтому вывод по экспериментальным образцам требует осторожности.
  14. B. Наличие — это присутствие последовательности ДНК; экспрессия — получение РНК и/или функционального продукта гена
    Последовательность может физически присутствовать, но быть неактивной или плохо транскрибироваться. Поэтому подтверждение ДНК-конструкции и измерение РНК/белка отвечают на разные экспериментальные вопросы.
  15. C. Плазмида с подходящим промотором с большей вероятностью обеспечит транскрипцию гена
    Подходящий промотор повышает вероятность того, что транскрипционный аппарат хозяина начнёт синтез РНК с нужного гена. Само наличие кодирующей области не заменяет регуляцию.
  16. A. Эффективное направленное соединение именно этих концов будет затруднено
    Комплементарность липких концов облегчает их спаривание перед лигированием. Если концы несовместимы, простое смешивание с лигазой не создаёт нужного соединения с той же эффективностью; требуется изменить стратегию сборки.
  17. B. Направить нуклеазу к комплементарной последовательности-мишени
    Направляющая РНК содержит участок, комплементарный целевой последовательности, и тем самым задаёт адрес для комплекса Cas. Разрез ДНК выполняет белок-нуклеаза, а последующий результат зависит от клеточного ремонта и конструкции эксперимента.
  18. D. Чтобы убедиться, что вывод связан с нужным изменением, а не с нежелательными изменениями в других местах
    Специфичность метода высока, но экспериментальный контроль нужен для оценки нежелательных изменений. Если дополнительное изменение затронуло важный ген, оно может исказить связь между запланированной модификацией и наблюдаемым признаком.
  19. B. Есть модифицированная и контрольная группы, подтверждён генотип и воспроизводимо различается измеряемый признак
    Причинный вывод требует сравнения с контролем и подтверждения того, что модификация действительно присутствует. Повторяемое изменение фенотипа при проверенном генотипе гораздо убедительнее одиночного наблюдения.
  20. C. Целенаправленное выключение или нарушение функции определённого гена
    Нокаут создают, чтобы резко снизить или устранить функцию выбранного гена и изучить последствия. Это не означает обязательного удаления всей хромосомы или простого изменения окраски клетки.
  21. D. Отбор по устойчивости выделил кандидатов, а скрининг показал нужный размер продукта у 42 колоний
    Устойчивость сообщает, что клетки прошли селекцию по маркеру, но не подтверждает структуру вставки. PCR разделил отобранные колонии на те, где обнаружен ожидаемый участок, и остальные, поэтому эти этапы нельзя смешивать.
  22. A. Признак может зависеть от среды и других генов, поэтому нужно подтвердить саму модификацию и использовать контролируемое сравнение
    Фенотип формируется взаимодействием генотипа и условий среды, а одинаковое внешнее изменение может иметь разные причины. Поэтому корректный эксперимент связывает наблюдаемый эффект с подтверждённой модификацией и сравнением с контролем.

Поделиться

Сохраните материал или отправьте тому, кому он пригодится.

Поставить оценку

Была ли статья полезной и понятной?

Пока нет оценок — будьте первым